通常用于腸道病毒分離的細(xì)胞系為RD細(xì)胞(對CA16和EV71敏感)、HEp-2細(xì)胞(對某些柯薩奇B組病毒敏感)等,聯(lián)合使用上述兩種或更多細(xì)胞(如Vero細(xì)胞)有助于分離到更多的腸道病毒。使用血清型特異性的中和抗血清進(jìn)行的中和實(shí)驗(yàn)是腸道病毒鑒定的基本方法,如果使用了適當(dāng)?shù)目寡澹瑢?shí)驗(yàn)結(jié)果是比較可靠的。因?yàn)?em>腸道病毒包括若干個(gè)血清型,通常使用組合抗血清進(jìn)行鑒定,有些組合抗血清已經(jīng)商品化。...
應(yīng)提供細(xì)胞傳代歷史過程中所用的細(xì)胞培養(yǎng)液的詳細(xì)成分并應(yīng)具有溯源性,如使用人或動(dòng)物源性成分,如血清、胰蛋白酶、乳蛋白水解物或其他生物學(xué)活性的物質(zhì),應(yīng)具有這些成分的來源、批號、制備方法、質(zhì)量控制、檢測結(jié)果和質(zhì)量保證的相關(guān)資料。 ?(二)細(xì)胞培養(yǎng)操作要求 ?細(xì)胞取材、建庫及制備全過程應(yīng)具有可溯源性及操作的一致性,并對各個(gè)環(huán)節(jié)的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行充分的評估。 ?1....
二、免疫學(xué)方法檢測細(xì)菌抗原或抗體的技術(shù) 在細(xì)菌診斷中利用免疫學(xué)的各種方法日益受到人們的極大關(guān)注,從而簡化了病原微生物的鑒定手續(xù)。1.抗血清凝集技術(shù) 早在1933年,Lancefield就成功地用多價(jià)血清對鏈球菌進(jìn)行了血清分型。隨著抗體制備技術(shù)的進(jìn)一步完善,尤其是單克隆抗體的制備,明顯提高了細(xì)菌凝集實(shí)驗(yàn)的特異性,今天廣泛用于細(xì)菌的分型和鑒定,如沙門氏菌、霍亂弧菌等。 ...
附錄:PCR實(shí)驗(yàn)的常見問題PCR產(chǎn)物的電泳檢測時(shí)間一般為48h以內(nèi),有些最好于當(dāng)日電泳檢測,大于48h后帶型不規(guī)則甚至消失。假陰性不出現(xiàn)擴(kuò)增條帶。PCR反應(yīng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)有①模板核酸的制備,②引物的質(zhì)量與特異性,③酶的質(zhì)量及溴乙錠的使用, ④PCR循環(huán)條件。尋找原因亦應(yīng)針對上述環(huán)節(jié)進(jìn)行分析研究。...
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