目的要求1．學(xué)習(xí)胰蛋白酶的純化及其結(jié)晶的基本方法。2．了解酶的活性與比活性的概念。實(shí)驗(yàn)原理胰蛋白酶是以無活性的酶原形式存在于動(dòng)物胰臟中，在Ca2+的存在下，被腸激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活，從肽鏈N端賴氨酸和異亮氨酸殘基之間的肽鍵斷開，失去一段六肽，分子構(gòu)象發(fā)生一定改變后轉(zhuǎn)變?yōu)橛谢钚缘囊鹊鞍酌?..
實(shí)驗(yàn)原理胰蛋白酶是以無活性的酶原形式存在于動(dòng)物胰臟中，在Ca2+的存在下，被腸激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活，從肽鏈N端賴氨酸和異亮氨酸殘基之間的肽鍵斷開，失去一段六肽，分子構(gòu)象發(fā)生一定改變后轉(zhuǎn)變?yōu)橛谢钚缘囊鹊鞍酌浮Ｒ鹊鞍酌冈姆肿恿考s為24000，其等電點(diǎn)約為pH8.9，胰蛋白酶的分子量與其酶原...
（9）0.8 mol/L pH9.0硼酸緩沖液：取20ml 0.8 mol/L硼酸溶液，加80ml 0.2 mol/L四硼酸鈉溶液，混合后，用pH計(jì)檢查校正。（10）0.4 mol/L pH9.0硼酸緩沖液（用0.8 mol/L稀釋1倍即可）；（11）0.2 mol/L pH8.0硼酸緩沖液：取...
三、儀器食品加工機(jī)和高速分散器；研缽；大玻璃漏斗；布氏漏斗；抽濾瓶；紗布；恒溫水浴；紫外分光光度計(jì)；秒表；pH試紙。操作方法一、豬胰蛋白酶制備（一）豬胰蛋白酶原的提取豬胰臟1.0Kg（新鮮的或殺后立即冷藏的），除去脂肪和結(jié)締組織后，絞碎。加入2倍體積預(yù)冷的乙酸酸化水（pH2.5）于10～15℃攪拌...
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