熒光分子的最大激發(fā)波長和最大發(fā)射波長的關系
任何熒光物質(zhì)都具有激發(fā)光譜和發(fā)射光譜。由于斯托克斯位移，熒光發(fā)射波長總是大于激發(fā)波長。并且，由于處于基態(tài)和激發(fā)態(tài)的振動能級幾乎具有相同的間隔，分子和軌道的對稱性都沒有改變，熒光化合物的熒光發(fā)射光譜和激光譜形式呈大同小異的"鏡象對稱"關系。
熒光激發(fā)光譜是通過測量熒光體的發(fā)光通量隨波長變化而獲得的光譜。它是熒光強度對激發(fā)波長的關系曲線，它可以反映不同波長激發(fā)光引起熒光的相對效率；熒光發(fā)射光譜是當熒光物質(zhì)在固定的激發(fā)光源照射后所產(chǎn)生的分子熒光，它是熒光強度對發(fā)射波長的關系曲線。它表示在所發(fā)射的熒光中各種波長組分的相對強度。由于各種不同的熒光物質(zhì)有它們各自特定的熒光發(fā)射波長值，所以，可用它來鑒別各種熒光物質(zhì)。
可以依據(jù)繪制其激發(fā)光譜曲線時所采用的最大激發(fā)波長值來確定某熒光物質(zhì)的分子熒光波長值和繪制熒光光譜曲線。同一熒光物質(zhì)的分子熒光發(fā)射光譜曲線的波長范圍不因它的激發(fā)波長值的改變而位移。由于這一熒光特性，如果固定熒光最大發(fā)射波長（λem），然后改變激發(fā)波長（λex），并以縱坐標為熒光強度，橫坐標為激發(fā)光波長繪圖即獲得激發(fā)光譜曲線，從中能確定最大激發(fā)波長（λex）。反之，固定最大激發(fā)光波波長值，測定不同發(fā)射波長時的熒光強度，即得熒光發(fā)射光譜曲線和最大熒光發(fā)射波長。
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