BHA和 BHT是油脂中常用的合成酚類抗氧化劑，世界各國對其限量使用有著嚴格的規定，我國的標準方法是 GB／T 5009．30--2003(食品中叔丁基羥基茴香醚(BHA)與 2，6一二叔丁基對甲酚(BHT)的測定》，目前，隨著分析檢測手段的提升，很多檢驗單位的氣相色譜儀未配置填充柱進樣口。但該方法中色譜柱不僅是填充柱，而且樣品的前處理時問過長。為此，本文針對樣品前處理時間較長的問題，用甲醇或乙腈提前法改進該方法的前處理，并用毛細管柱替換填充柱進行比對驗證試驗，方法前處理的改進和實驗數據對今后檢測菜籽油中 BHA和 BHT有一定的應用意義。

1 ?材料和方法

1．1 ?儀器

氣相色譜儀：島津 GC2010、帶 FID檢測器、自帶色譜工作站；氣相色譜檢測條件：hp一5毛細管色譜柱(30 m×0．32 um×0．25 am)，柱溫程序升溫(80°C，0 min，20°C／min，230°C，10 min)，進樣 口溫度 200~(2、檢測器溫度280~(2；氮氣(N )流速40 mL／min，氫氣(H2)40 mL／min，空氣 450 mL／min，進樣體積0．5 IxL。

1．2 ?試劑和材料

@BHA、BHT混合標準液：準確稱取 BHA、BHT各 0．1000 g混合后用二硫化碳溶解，定容至 100mL，此溶液分別為每毫升含 1．0 mg BHA、BHT，置冰箱貯藏應用時吸取原液4 mL于 100 mL容量瓶中，用二硫化碳定容至 100 mL，此容液分別為每毫升含 0．040 mg BHA、BHT，置冰箱中貯藏；②常用試劑二氯甲烷、正己烷、乙腈、甲醇和石油醚；③層析柱：1 cm x30 cm玻璃柱、帶活塞，加入少量玻璃棉于層析柱底部，再加少量無水硫酸鈉，然后稱取 6 g硅膠和4 g弗羅里矽土(用前均于 120~C活化)，用石油醚濕法混合裝柱，柱頂部再加入少量無水硫酸鈉；④比色管10 mL和梨形分液漏斗 125 mL；⑤菜籽油，市售，經檢測不含有 BHA、BHT。

1．3 ?樣品前處理

樣品分別用柱層析法、甲醇提取法和乙腈提取法三種方法進行前處理。

質量控制

1．3．1 柱層析法 稱取混合均勻樣品 1．00 g放人50 mL燒杯中，加25 mL石油醚溶解轉到層析柱上，再用 10 mL石油醚分數次洗滌燒杯并轉移到層析柱，用 100 mL二氯甲烷分5次淋洗 ，合并淋洗液，濃縮近干，用二硫化碳定容至 2 mL，進行氣相色譜分析。

1．3．2 乙腈提取法 稱取均勻樣品 1．O0 g置于125 mL梨形分液漏斗中，加 5 mL正己烷溶解油樣，用乙腈分 2次提取，每次 10 mL合并提取液，在旋轉

蒸發器上濃縮近干，定容至 1 mL進行氣相色譜分析。

1．3．3 ?甲醇提取法 稱取均勻樣品 1．00 g置于125 mL梨形分液漏斗中，用甲醇分 2次提取 ，每次10 mL合并提取液，在旋轉蒸發器上揮發近干，定容止 1 mL進行氣相色譜分析。

1．4 操作方法

樣品分別用柱層析法、甲醇提取法和乙腈提取法三種方法進行前處理，用 1．1規定的儀器和色譜條件進行色譜分析。

2 結果和討論

2．1 ?曲線線性關系和檢測限測定 ?t將標準貯備液用二硫化碳配制成一組標準系列，其濃度為 0．02、0．04、0．06、0．08、0．10 mg／mL，進樣0．5 ?進行氣相色譜分析。用峰面積與濃度進行線性回歸分析 Y =aX +b，BHA和 BHT的相關系數 r均大于0．999(見表 1)，從圖 1可以看出檢測成分在 6．4～7．0 min之間，能有效消除樣品中其他成分的干擾，表明用 hp一5毛細管色譜柱可以達到很好的分離效果；將標準貯備液用二硫化碳配制成一個較低濃度(0．01 mg／mL)BHA、BHT混合標準液，進行氣相氣譜測定，連續測定 3次 ，以 3倍的噪聲值作為方法的最低檢測限，檢測限均可達到0．5 ug。

2．2 回收率測定

將一定量的BHA、BHT混合抗氧化劑加入不含有 BHA、BHT的食用油脂 中，制成 0．05、0．1、0．2kg 3個濃度的加標樣品，每個濃度取 3個平行樣品，樣品經三種前處理方法處理后，應用氣相色譜儀分析測得平均回收率在89．5％～98％之間，回收效果良好(見表 2)。

表2 檢測方法回收率試驗

2．3 討論

按照國標方法中柱層析法測定菜籽油中的 BHA和 BHT前處理過程比較復雜，而且時間較長(一般在 1—2天)，同時需要大量溶劑(100 mL石油醚，200 mL二氯甲烷)，而乙腈提取和甲醇提取法則僅

需要20 mL乙腈或甲醇，分 2次提取只需數十分鐘；(見表 3三種前處理方法比較)因此我們認為乙腈提取法和甲醇提取法優于柱層析法；但乙腈的價格高于甲醇，而毒性較甲醇大，我們認為甲醇提取法更為適合。

3 ?結論

三種前處理方法均適用于同時測定 BHA和BHT，可以相互替代，甲醇提取法則更加快速；用hp一5毛細管色譜柱(30 m×0．32 Ixm×0．25 m)測定實驗植物油中的抗氧劑 BHA、BHT，能有效消除樣品中其他成分的干擾，可以達到很好的分離效果，檢測時問在 10min之內。