原子熒光形態分析儀測試食品中無機砷
食品中無機砷經稀硝酸提取后，以液相色譜進行分離，分離后的目標化合物在酸性環境下與KBH4反應，生成氣態砷化合物，以原子熒光光譜儀進行測定。
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試劑和材料
注：所用試劑均為優級純，水為GB/T 6682規定的一級水。
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所需試劑
1、磷酸二氫銨(NH4H2PO4)：分析純。
2、硼氫化鉀(KBH4)：分析純。
3、氫氧化鉀(KOH)。
4、硝酸(HNO3)。
5、鹽酸(HCI)。
6、氨水(NH3·H2O)。
7、正己烷[CH3(CH2)4CH3]。
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試劑配制
1、鹽酸溶液[20%（體積分數）]：量取200 mL鹽酸，溶于水并稀釋至1000 mL。
2、硝酸溶液(0.15 mol/L)：量取10 mL硝酸，溶于水并稀釋至1 000 mL。
3、氫氧化鉀溶液(100 g/L)：稱取10 g氫氧化鉀，溶于水并稀釋至100 mL。
4、氫氧化鉀溶液(5 g/L)：稱取5 g氫氧化鉀，溶于水并稀釋至1 000 mL。
5、硼氫化鉀溶液(30 g/L)：稱取30 g硼氫化鉀，用5 g/L氫氧化鉀溶液溶解并定容至1 000 mL。
現用現配。
6、磷酸二氫銨溶液(20 mmol/L)：稱取2.3 g磷酸二氫銨，溶于1 000 mL水中，以氨水調節pH至8.0，經0.45 μm水系濾膜過濾后，于超聲水浴中超聲脫氣30 min，備用。
7、磷酸二氫銨溶液(1 mmol/L)：量取20 mmol/L磷酸二氫銨溶液50 mL，水稀釋至1 000 mL，
以氨水調pH至9.0，經0.45 μm水系濾膜過濾后，于超聲水浴中超聲脫氣30 min,備用。
8、磷酸二氫銨溶液(15 mmol/L)：稱取1.7 g磷酸二氫銨，溶于1 000 mL水中，以氨水調節pH至6.0，經0.45 μm水系濾膜過濾后，于超聲水浴中超聲脫氣30 min，備用。
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標準品
1、三氧化二砷(As203)標準品：純度≥99.5%。
2、砷酸二氫鉀(KH2AsO4)標準品：純度≥99.5%。
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標準溶液配制
1、亞砷酸鹽[As(Ⅲ)]標準儲備液（100 mg/L，按As計）：準確稱取三氧化二砷0.0132g，加100 g/L氫氧化鉀溶液1 mL和少量水溶解，轉入100 mL容量瓶中，加入適量鹽酸調整其酸度近中性，加水稀釋至刻度。4℃保存，保存期一年。或購買經國家認證并授予標準物質證書的標準溶液物質。
2、砷酸鹽[As(V)]標準儲備液（100 mg/L，按As計）：準確稱取砷酸二氫鉀0.0240g，水溶解，轉入100 mL容量瓶中并用水稀釋至刻度。4℃保存，保存期一年。或購買經國家認證并授予標準物質證
書的標準溶液物質。
3、As(Ⅲ)、As(V)混合標準使用液（1.00 mg/L，按As計）：分別準確吸取1.0 mL As(Ⅲ)標準儲備液(100 mg/L)、1.0 mL As(V)標準儲備液(100 mg/L)于100 mL容量瓶中，加水稀釋并定容至刻度。現用現配。
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儀器和設備
注：所用玻璃器皿均需以硝酸溶液(1+4)浸泡24 h，用水反復沖洗，最后用去離子水沖洗干凈。
1、液相色譜原子熒光光譜聯用儀（原子熒光形態分析儀）：由液相色譜儀（包括液相色譜泵和手動進樣閥）、在線消解模塊與原子熒光光譜儀組成。
2、組織勻漿器。
3、高速粉碎機。
4、泠凍干燥機。
5、離心機：轉速≥8 000 r/min。
6、pH計：精度為0.01。
7、天平：感量為0.1 mg和1 mg。
8、恒溫干燥箱(50℃～300℃)。
9、C18凈化小柱或等效柱。
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分析步驟
試樣提取
1、稻米樣品
稱取約1.0 g稻米試樣（準確至0.001 g）于50 mL塑料離心管中，加入20 mL 0.15 mol/L硝酸溶液，放置過夜。于90℃恒溫箱中熱浸提2.5 h，每0.5 h振搖1 min。提取完畢，取出冷卻至室溫，8 000 r/min離心15 min，取上層清液，經0.45 μm有機濾膜過濾后進樣測定。按同一操作方法作空白試驗。
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2、水產動物樣品
稱取約1.0 g水產動物濕樣（準確至0.001 g），置于50 mL塑料離心管中，加入20 mL 0.15 mol/L硝酸溶液，放置過夜。于90℃恒溫箱中熱浸提2.5 h，每0.5 h振搖1 min。提取完畢，取m冷卻至室溫，8 000 r/min離心15 min。取5 mL上清液置于離心管中，加入5 mL正己烷，振搖1 min后，8 000 r/min離心15 min，棄去上層正己烷。按此過程重復一次。吸取下層清液，經0.45 μm有機濾膜
過濾及C18小柱凈化后進樣。按同一操作方法作空白試驗。
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3、嬰幼兒輔助食品樣品
?稱取嬰幼兒輔助食品約1.0 g（準確至0.001 g）于15 mL塑料離心管中，加入10 mL 0.15 mol/L硝酸溶液，放置過夜。于90℃恒溫箱中熱浸提2.5 h，每0.5 h振搖1 min，提取完畢，取m冷卻至室溫。8 000 r/min離心15 min。取5 mL上清液置于離心管中，加入5 mL正己烷，振搖1 min，8 000 r/min離心15 min，棄去上層正己烷。按此過程重復一次。吸取下層清液，經0.45 μm有機濾膜過濾及C18小柱凈化后進行分析。按同一操作方法作空白試驗。
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儀器參考條件
液相色譜參考條件
色譜柱：陰離子交換色譜柱（柱長250 mm，內徑4 mm），或等效柱。陰離子交換色譜保護柱（柱長10 mm，內徑4 mm），或等效柱。
流動相組成：
等度洗脫流動相：15 mmol/L磷酸二氫銨溶液(pH 6.0)，流動相洗脫方式：等度洗脫。流動相流速：1.0 mL/min;進樣體積：100 μL。
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原子熒光檢測參考條件（以SK-博析-LC原子熒光形態分析儀為例）
光源：空芯陰極燈，燈電流60~80mA????
負高壓：-300~-350V?????
主氣流量：為定值，500mL/min左右????????????????????
輔氣流量：800~1000mL/min
泵速：70~80轉/min
檢出限(參考值)：0.01ng/mL
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標準曲線制作
取7支10 mL容量瓶，分別準確加入1.00 mg/L混合標準使用液0.00 mL、0.05 mL、0.10 mL、0.20 mL、0.30 mL、0.50 mL和1.0 mL，加水稀釋至刻度，此標準系列溶液的濃度分別為0.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL、30ng/mL、50 ng/mL和100 ng/mL。
吸取標準系列溶液100 μL注入液相色譜原子熒光光譜聯用儀進行分析，得到色譜圖，以保留時間定性。以標準系列溶液中目標化合物的濃度為橫坐標，色譜峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。
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試樣溶液的測定
吸取試樣溶液100 μL注入液相色譜原子熒光光譜聯用儀中，得到色譜圖，以保留時間定性。根據標準曲線得到試樣溶液中As(Ⅲ)與As( V)含量，As(Ⅲ)與As(V)含量的加和為總無機砷含量，平行測定次數不少于兩次。
